方法提要

本方法采用的是计数浓度法。即通过收集悬游在空气中的生物性粒子，放在专门的培养基，经若干时间和适宜的生长条件后，让其繁殖到可见的菌落计数，以此来判定改洁净车间的微生物浓度

测试人员的要求

1、测试人员应进行本专业的培训并获得相应资格后才能旅行对洁净车间的职责，其中包含设计的卫生知识和基本微生物知识

2、测试人员应选择与无菌包装生产操作的空气洁净度级别要求相适应的穿戴方式，外面的衣服不能带进100000级以上的区域

需要准备的仪器

a) 浮游菌采样器

b) 培养皿

c) 培养基

d) 恒温培养箱

e) 高压真气灭菌器

测试步骤

1、测试前需要对仪器、培养皿表面进行严格消毒

注：采样器在进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂进行灭菌处理，用于100级洁净室的采样器宜预先放在被测房间内

2、用消毒剂擦净培养皿的外表面

3、采样前，先用消毒剂清洗采样器的顶端、转盘以及罩子的内外面，采样结束，再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘

4、采样口及采样管，使用前要先进行高温灭菌。如用消毒剂对采样管进行消毒时，应将管中的残留液倒掉并晾干。无菌吸塑盒

5、采样者穿戴与被测洁净区域相应的工作服，在转盘上放入或调换培养皿前，双手用消毒剂消毒或者戴无菌手套操作

6、采样仪器经消毒后先不放入培养皿，开启浮游菌采样器，使仪器中的残余消毒剂蒸发，并检查流量，然后根据采样量调整设定的采样时间

7、关闭浮游菌采样器，放入培养皿，盖上盖子

8、置采样口于采样点后，开启浮游菌采样器进行采样

9、全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温箱中培养

注：

1）采用大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）配置的培养皿经采样后，在30℃～35℃培养箱中培养，时间不少于2d；采用沙氏培养基（SDA）配制的培养皿经采样后，在20℃～25℃培养箱中培养，时间不少于5d

2）每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染

10、用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记或在菌落数查是否有遗漏